NY∕T 3693-2020 百合枯萎病抗性鉴定技术规程(农业)
|
ID： |
816103E5D44D4B438C64E2C803E6C806 |
|
文件大小(MB)： |
0.33 |
|
页数： |
9 |
|
文件格式： |
|
|
日期： |
2021-12-24 |
|
购买： |
文本摘录（文本识别可能有误，但文件阅览显示及打印正常，pdf文件可进行文字搜索定位）：
?,ICS 65.020.01,B 15 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY /T 3693-2020,百合枯萎病抗性鉴定技术规程,Technical code of practice for identification of lily resistance to fusarium wilt,2020 - 08 - 26 发布2021 一01 - 01 实施,发布,~/T 3693--2020,本标准按照GB/ T 1.,本标准自,本标准起草单位云南省农胁'品卉吨脚赏园艺工程问究中心、农业农叫卉,产品质量监督检验测试中心(昆明)、云南省花卉育手F重点实验室、云南省花卉工程技术研究中心、云南省,花卉标准化技术委员会、昆明市花卉遗传改良重点实验室、云南云科花卉有限公司,本标准主要起草人张艺萍、杨秀梅、瞿紫萍、王继华、王丽花、张丽芳、苏艳、许凤、周旭红、邹凌、赵阿,香、马璐琳,I,~/T 3693--2020,百合枯萎病抗性鉴定技术规程,1 范围,本标准规定了百合枯萎病抗性鉴定的试剂与耗材、仪器设备、枯萎病菌接种体制备、室内抗性鉴定、病,情调查、抗病性评价和鉴定材料处理,本标准适用于百合(Lil i um spp,2 规范性引用文件,4 仪器设备,5,5. 1 病原物分离,5. 1 1 病样采集,参照附录A ，田,入4'C 冰箱保存备用,5. 1 2 病样处理,的室内鉴定与抗性评价,补IJO蒸馆水至,放入封口袋密封，登记编号后放,取病株病健组织交界部位， 用解剖刀切成1 cm 长的茎段，或取百合带病种球，于病健组织交界部位切取,小块鳞茎( 0 . 5 cmXO. 5 cm) ，自来水清洗干净后用75%酒精浸2 s-3 s ，再用2%次氯酸例溶液浸泡3 min,取出用灭菌水清洗3 次,5. 13 病原分离,在超净工作台内， 将消毒好的茎段或小块鳞茎接种至PSA 平板培养基，每培养皿接3 块- 4 块，写明,编号后用保鲜膜封好，放至(25 :I: 2)'C 培养箱中培养5 d-7 d,5. 14 分离物鉴定及纯化,分离物鉴定参见附录A 。确认为尖抱镰刀菌百合专化型(F.ω anum oxysporutη f. sp. Lilii) 后， 采用,单抱分离法进行分离物纯化， 经科赫(Koc h ) 法则验证后，将经过纯化的百合枯萎病致病菌接种于PSA 斜,NY/T 3693-2020,面培养基上，在(25 ::1:: 2)OC 的恒温培养箱中培养7 d ，置于40C ~ 80C 冰箱内保存备用,5.2 接种体繁殖和保存,5. 2 1 接种体的繁殖,将保存的百合枯萎病菌置于25 0CPSA 平板培养基上培养3 d 活化后，接种于盛有PS 培养液的锥形,瓶中，置于(25 土2)OC摇床上，以120 r/ min 振荡培养3 d ~ 5 d O 将培养液经两层医用纱布过滤即得以小,型袍子为主的袍子悬浮液，然后用蒸馆水稀释滤液至所需接种浓度,5.22 接种体保存,常用保存方法为将百合枯萎病菌接种于PSA 斜面培养基上，在(25 土2)OC 的恒温培养箱中培养7 d,置于40C ~80C 冰箱内保存,6 室内抗性鉴定,6. 1 鉴定室,人工接种鉴定室应具备人工调节温度、湿度及光照的条件，使人工接种后具备良好的发病环境,6. 2 鉴定设计,鉴定材料随机排列或顺序排列，每份鉴定材料重复3 次，每一次重复10 株苗或是20 片鳞片,6. 3 鉴定对照材料,设高抗百合品种为抗病对照品种， 高感百合品种为感病对照品种，同时设置空白对照,6 4 鉴定材料准备,6.4.1 采用百合组培生根苗囚将百合组培生根苗移栽至穴盘中炼菌，炼菌基质为泥炭:珍珠岩= 2 1,(体积比) ，经高温蒸汽灭茵(1 34 0C ,30 min) 。在温室或塑料大棚内炼菌，设施内温度白天为20 0C ~ 260C ,夜晚为150C ~ 200C 。所有幼苗应生长健壮、一致，每株幼苗有8 片以上展开叶,6. 4 2 采用百合种球鳞片。将不同系列正常可开花的百合种球由基部小心剥离，去除外层鳞片，将中层,鳞片置于1 % NaCI O 溶液中消毒10 min ，在自来水下冲洗干净后置于滤纸上晾干待用,6. 5 接种,6.5. 1 接种时期,缓苗后正常生长的幼苗和消毒晾干后的鳞片,6. 5.2 接种浓度,接种体悬浮液的分生袍子数为(1 ~ L 5) X lO' 个/ mL o,6 5.3 接种方法,6. 5. 3. 1 百合组培生根苗采用灌根接种法。用灭菌注射器吸取接种体悬浮液注射至百合植株茎基部，每,株注射2 mL 。接种后用塑料薄膜覆盖植株， 保湿48 h ,6. 5. 3. 2 百合(种球)鳞片采用土壤接种法。用接种针挑取小块保存的接种体菌丝接种于马铃薯煎糖琼,JJ旨培养基(PSA) 上，待菌丝长满平板后用打孔器切取5 块直径为8 mm 的菌块，接种至灭菌的100 mL 燕,麦基质泥炭混合物中， 燕麦:泥炭= 1 : 5(W /W) 0 (25 土2)OC 培养14 d 后，将菌土混合物充分压碎，按,l%(V/V) 的比例加入灭菌基质泥炭中，混匀， (25 ::1:: 2)OC培养14 d ，使菌落稳定后，将百合鳞片包埋于含有,菌土的基质中;或将鳞片抨插到基质中，注意基部朝下，插入深度为鳞片的1 / 2 ，间距3cm ,6. 5. 3. 3 空白对照是采用无菌水代替袍子悬浮液进行接种,6. 5 4 接种后管理,6.5.4. 1 接种后将植株置于鉴定室内，每天光照14 h ，强度为70μEm -气，保持植株正常生长的土壤湿,度，即60 ……
……